Ultra Nuclease gred GMP
No Kucing: HC2016A
Gred GMP UltraNuclease dinyatakan dan disucikan dalam Escherichia coli (E.coli) oleh kejuruteraan genetik dan disediakan di bawah persekitaran GMP.Ia boleh mengurangkan kelikatan supernatan sel dan lisat sel dalam penyelidikan saintifik, meningkatkan kecekapan penulenan protein dan meningkatkan penyelidikan fungsi protein.Produk ini juga boleh mengurangkan sisa asid nukleik perumah kepada gred pg, meningkatkan prestasi dan keselamatan produk biologi aplikasi termasuk penulenan virus, pembuatan vaksin dan pembuatan farmaseutikal protein/polisakarida.Selain itu, produk itu juga boleh digunakan untuk mencegah penggumpalan sel mononuklear darah periferal manusia (PBMC) dalam terapi sel dan pembangunan vaksin.
UltraNuclease disediakan dalam bentuk reagen yang disterilkan, dicairkan dalam penimbal (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliserin), dengan rupa cecair yang tidak berwarna dan lutsinar.Produk ini dihasilkan oleh keperluan proses GMP dan disediakan dalam bentuk cecair.
Komponen
UltraNuclease gred GMP (250 U/μL)
Keadaan Penyimpanan
Produk dihantar dengan ais kering dan boleh disimpan pada -25℃~-15°C selama dua tahun.
Jika produk dibuka dan telah disimpan pada suhu 4 ℃ selama lebih daripada seminggu, kami mengesyorkan penapisanproduk untuk mengelakkan pencemaran mikrob.
Spesifikasi
| Hos Ekspresi | E. coli rekombinan dengan gen UltraNuclease |
| Berat Molekul | 26.5 kDa |
| titik soelektrik | 6.85 |
| Kesucian | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Penampan Storan | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliserin |
|
Definisi Unit | Takrif satu unit Aktiviti (U) ialah jumlah enzim yang digunakan untuktukar nilai serapan ΔA260 sebanyak 1.0 dalam 30 minit dalam 2. 625 mLsistem tindak balas pada 37 ℃ dengan pH 8.0 (bersamaan dengan penghadaman lengkap37 μg DNA sperma salmon menjadi oligonukleotida). |
Arahan
1. Sampel Koleksi
Sel melekat: keluarkan medium, basuh sel dengan PBS, dan keluarkan supernatan.
Sel penggantungan: kumpulkan sel dengan sentrifugasi, cuci sel dengan PBS, sentrifuge pada 6,000rpm selama 10 min, kumpulkan pelet.
Escherichia coli: kumpulkan bakteria dengan sentrifugasi, basuh sekali dengan PBS, sentrifuge pada 8,000rpm selama 5 minit, dan kumpulkan pelet.
2. Rawatan Sampel
Rawat pelet sel yang dikumpul dengan penimbal lisis pada nisbah jisim(g) kepada isipadu(mL)1:(10-20), atau dengan kaedah mekanikal atau kimia pada ais atau pada suhu bilik (1g pelet sel mengandungi kira-kira
109 sel).
3. Rawatan Enzim
Tambahkan 1-5mM MgCl pada sistem tindak balas dan laraskan pH kepada 8-9.
Tambah UltraNuclease mengikut nisbah 250 Unit untuk mencerna 1 g pelet sel, mengeram pada 37 ℃ selama lebih daripada 30 minit.Sila rujuk borang "Masa Reaksi Disyorkan" untuk memilihtempoh rawatan.
4. Supernatan Koleksi
Sentrifuge pada 12,000 rpm selama 30 minit dan kumpulkan supernatan.
Nota: Jika larutan berasid atau beralkali, atau mengandungi kepekatan tinggi garam, detergen, ataudenaturan, sila tingkatkan dos enzim atau lanjutkan masa rawatan dengan sewajarnya.
Keadaan tindak balas yang disyorkanons
| Parameter | Keadaan Optimum | Keadaan Berkesan |
| Mg²+Kepekatan | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Suhu | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Kepekatan DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Kepekatan Mercaptoethanol | 0-100 mM | >0 mM |
| Kepekatan Kation Monovalen | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Kepekatan lon fosfat | 0-10 mM | 0-100 mM |
Disyorkan Reaksi Masa (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Amaun UltraNuclease (Kepekatan Akhir) | Masa tindak balas |
| 0.25 U/mL | >10 j |
| 2.5 U/mL | >4j |
| 25 U/mL | 30 min |
Nota:
Sila pakai PPE yang diperlukan, kot makmal dan sarung tangan, untuk memastikan kesihatan dan keselamatan anda!
