Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Penerangan
No Kucing: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix ialah Kit PCR kuantitatif multipleks berdasarkan RNA sebagai templat.Dalam eksperimen, transkripsi terbalik dan PCR kuantitatif dilakukan dalam tiub tindak balas yang sama, memudahkan operasi eksperimen dan mengurangkan risiko pencemaran.Reka bentuk unik campuran penimbal dan enzim boleh digunakan dalam sistem lyophilized satu langkah.Kit ini menggunakan Reverse Transcriptase tahan haba untuk sintesis cDNA untai pertama yang cekap menggunakan Hotstart Taq DNA Polymerase untuk penguatan kuantitatif.Ia mengandungi penimbal tindak balas yang dioptimumkan, campuran enzim dsb., dan faktor yang berkesan menghalang penguatan PCR bukan spesifik dan meningkatkan kecekapan penguatan berbilang tindak balas qPCR telah ditambah, membolehkan penguatan kuantitatif pendarfluor berbilang sambil memastikan kecekapan penguatan primer.
Komponen
| Nama |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Campuran Lyo-Enzim |
| 3. Lyo pelindung |
Keadaan pengangkutanion
A: Lyo-buffer dan protectant: -25~-15℃, jangka hayat adalah 1 tahun.
B: Campuran Lyo-enzim, 2-8 ℃, jangka hayat ialah 6 bulan.
Arahan untuk operasi
1. Sistem Tindak Balas (Ambil 25μL sebagai contoh )
| Komponen | Isipadu (μL) | Kepekatan Akhir |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Campuran Lyo-Enzim | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Campuran Primer (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| Campuran Probe (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| Templat RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Sehingga 25 | - |
2. Protokol Berbasikal Dioptimumkan
1) Protokol Berbasikal Standard
| Peringkat tindak balas | Suhu | Masa | Kitaran | |
| 1 | Transkripsi terbalik | 50°Ca | 10min | 1 |
| 2 | Denaturasi awal | 95°C | 5 minit | 1 |
| 3 | Tindak balas penguatan | 95°C | 15 saat | 45 kitaran |
| 60°Cb | 30 saatc |
2) Protokol Berbasikal Pantas
|
| Peringkat tindak balas | Suhu | Masa | Kitaran |
| 1 | Transkripsi terbalik | 50°Ca | 2minit | 1 |
| 2 | Denaturasi awal | 95°C | 2saat | 1 |
| 3 | Tindak balas penguatan | 95°C | 1 saat |
45 kitaran |
| 60°Cb | 13 saatc |
Catatan:
a) terbalik transkripsi: Suhu boleh memilih 42°C atau 50°C selama 10-15 minit.
b) Tindak balas penguatan: Suhu dilaraskan mengikut nilai Tm primer yang direka bentuk.
c)Pendarfluor isyarat pemerolehan: Sila tetapkan prosedur eksperimen mengikut keperluanmanual instrumen.
Maklumat/Spesifikasi Teknikal
| Mula Panas | Permulaan panas terbina dalam |
| Kaedah pengesanan | Pengesanan kuar primer |
| kaedah PCR | Satu langkah RT-qPCR |
| Jenis sampel | RNA |
Nota
1. Produk ini adalah untuk kegunaan penyelidikan sahaja.
2. Sila pakai PPE yang diperlukan, kot makmal dan sarung tangan, untuk memastikan kesihatan dan keselamatan anda！
