Satu Langkah RT-qPCR SYBR Premix Hijau
No Kucing: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix adalah untuk kuantifikasi pendarfluor berdasarkan pewarna SYBR Green I.Menggunakan primer khusus gen, transkripsi terbalik dan tindak balas qPCR dilengkapkan dalam satu tiub, menghapuskan keperluan untuk operasi pembukaan penutup dan pemipetan berulang, meningkatkan kecekapan ujian dan mengurangkan risiko pencemaran.Untuk sampel RNA, kit ini menggunakan Reverse Transcriptase tahan haba untuk sintesis cDNA yang cekap dan HotStart Taq DNA Polymerase untuk penguatan kuantitatif.Di bawah sistem penimbal yang dioptimumkan, sensitiviti kit boleh setinggi 0.1 pg untuk sasaran yang sangat dinyatakan dan setinggi 1 pg untuk sasaran yang dinyatakan secara sederhana.Kit ini sesuai untuk amplifikasi dan kuantifikasi sampel DNA.Ia membolehkan pengesanan sensitif dan kuantifikasi asid nukleik daripada sampel tumbuhan dan haiwan, sel dan mikroorganisma yang berbeza.
Komponen
| No | Nama | Kelantangan | Kelantangan |
| 1 | Penampan Lanjutan | 250 μL | 2×1.25 mL |
| 2 | Campuran Enzim Lanjutan | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Percuma H2O | 250 μL | 2×1.25 mL |
Keadaan Penyimpanan
Produk ini hendaklah disimpan pada suhu -25~-15℃ dari cahaya selama 1 tahun.
Arahan
1. Konfigurasi sistem tindak balasd
| Komponen | Isipadu (μL) | Isipadu (μL) | Kepekatan akhir |
| Penampan Lanjutan | 12.5 | 25 | 1× |
| Campuran Enzim Lanjutan | 1 | 2 | - |
| Primer Hadapan (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Primer Terbalik (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Tamplate RNAb | X | X | - |
| RNase Percuma H2Oc | ke 25 | kepada 50 | - |
Nota:
1) a.Tkepekatan primer akhir ialah 0.2 μmol/L, yang juga boleh dilaraskan antara 0.1 dan 1μmol/L mengikut kesesuaian.
2) b.Reagen adalah sangat sensitif, dengan Jumlah RNA dalam julat 1pg-1μg, dan ujian sampel manusia menunjukkan input optimum 1 pg-100 ng, mengawal nilai Ct keseluruhan dalam julat 15-30 mengikut kesesuaian.
3) c.Adalah disyorkan untuk menggunakan 20μL atau 50μL untuk memastikan kesahihan dan kebolehulangan penguatan gen sasaran.
4) d.Sila sediakan di bangku ultra-bersih dan gunakan petua bebas sisa nuklease dan tiub tindak balas;petua dengan kartrij penapis disyorkan.Elakkan pencemaran silang dan pencemaran aerosol.
2.Program tindak balas
| Langkah kitaran | Temp. | Masa | Kitaran |
| Transkripsi terbalik | 50 ℃a | 6minit | 1 |
| Denaturasi awal | 95 ℃ | 5minit | 1 |
| Tindak balas penguatan | 95 ℃ | 15 saat | 40 |
| 60 ℃b | 30 saat | ||
| Peringkat lengkung lebur | Lalai Instrumen | 1 | |
Nota:
1) a.Suhu transkripsi terbalik boleh dipilih antara 50-55°C mengikut keperluan eksperimen.Untuk sampel DNA, proses transkripsi terbalik boleh ditinggalkan.
2) b.Dalam kes khas, suhu penyepuhlindapan/pelanjutan boleh dilaraskan mengikut nilai Tm primer, 60°C disyorkan.
Nota
1. Produk ini adalah untuk kegunaan penyelidikan sahaja.
2. Sila kendalikan kot makmal dan sarung tangan pakai buang, untuk keselamatan anda.
