2×PCR Master Mix (tanpa Pewarna)
PCR Master Mix ialah sejenis penyelesaian pracampuran PCR konvensional yang sedia untuk digunakan, termasuk Taq DNA Polymerase, dNTP campuran MgCl2 dan penimbal yang dioptimumkan.Semasa tindak balas, hanya primer dan templat boleh ditambah untuk penguatan, yang sangat memudahkan langkah operasi eksperimen.Produk ini mengandungi penstabil yang sangat baik dan boleh disimpan selama 3 bulan pada suhu 4℃.Produk PCR mempunyai tonjolan 3′-dA dan boleh diklon dengan mudah ke dalam vektor T.
Keadaan Penyimpanan
Produk hendaklah disimpan pada -25℃~ -15℃ selama dua tahun.
Spesifikasi
| Kesetiaan (vs.Taq) | 1× |
| Mula Panas | No |
| tidak terjual | 3′-A |
| Polimerase | Taq DNA Polimerase |
| Format Reaksi | SuperMix atau Master Mix |
| Kelajuan Reaksi | Standard |
| jenis produk | Campuran Induk PCR (2×) |
Arahan
1.Sistem Tindak Balas
| Komponen | Saiz (μL) |
| DNA templat | sesuai |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Campuran Induk PCR | 25 |
| ddH2O | Ke 50 |
2.Protokol Penguatan
| Langkah kitaran | Suhu (°C) | Masa | Kitaran |
| Pra-denaturasi | 94 ℃ | 5minit | 1 |
| Denaturasi | 94 ℃ | 30 saat | 35 |
| Penyepuhlindapan | 50-60 ℃ | 30 saat | |
| Sambungan | 72 ℃ | 30-60saat/kb | |
| Sambungan Akhir | 72 ℃ | 10minit | 1 |
Nota:
1) Penggunaan templat: 50-200 ng DNA genomik;0.1- 10 ng DNA plasmid.
2) Mg2+kepekatan: Produk ini mengandungi 3 mM MgCl2 yang sesuai untuk kebanyakan tindak balas PCR.
3) Suhu penyepuhlindapan: Sila rujuk nilai Tm teoritis Primer.Suhu penyepuhlindapan boleh ditetapkan kepada 2-5 ℃ lebih rendah daripada nilai teori primer.
4) Masa lanjutan: Untuk pengecaman molekul, 30 saat/kb disyorkan.Untuk pengklonan gen, 60sec/kb adalah disyorkan.
Nota
1.Untuk keselamatan dan kesihatan anda, sila pakai kot makmal dan sarung tangan pakai buang untuk operasi.
2.Untuk kegunaan penyelidikan sahaja!
