Reagen Pelepasan Sampel
Reagen Pelepasan Sampel adalah untuk senario diagnostik POCT molekul.Untuk dua sistem LAMP amplifikasi langsung dan PCR amplifikasi langsung, tidak ada keperluan untuk pengekstrakan asid nukleik.Lysate mentah sampel boleh terus dikuatkan, gen sasaran boleh dikesan dengan tepat, masa pengesanan sampel boleh dipendekkan lagi, yang sangat sepadan dengan keperluan aplikasi POCT molekul.Ia sesuai untuk sapuan hidung, sapuan tekak dan jenis sampel lain.Sampel yang diproses boleh digunakan terus untuk pengesanan PCR atau LAMP kuantitatif pendarfluor masa nyata, dan keputusan yang sama seperti kaedah pengekstrakan konvensional boleh dicapai tanpa operasi pengekstrakan asid nukleik yang rumit.
Keadaan Penyimpanan
Angkut dan simpan pada suhu bilik.
Kawalan kualiti
Pengesanan fungsional – qPCR kuantitatif: Sistem Reagen Pelepasan Sampel 800μl telah dikuatkan
dengan 1000 salinan Novel Pseudovirus, satu sampel swab hidung, menghasilkan lengkung amplifikasi yang serupa danNilai ΔCt dalam ± 0.5 Ct.
Prosedur Eksperimensemula
1. Ambil 800 μl Sampel Reagen Pelepasan dan sebarkan larutan lisis ke dalam 1.5 mL tiub pensampelan
2. Ambil sapuan hidung atau sapu tekak dengan sapuan; Prosedur pensampelan sapuan hidung: ambil sapuan steril dan masukkan ke dalam lubang hidung, perlahan-lahan mara ke dalam kira-kira 1.5 cm, putar perlahan-lahan 4 kali terhadap mukosa hidung selama lebih daripada 15 saat , kemudian ulangi operasi yang sama pada rongga hidung yang lain dengan sapuan yang sama.Prosedur pensampelan swab tekak: ambil swab steril dan perlahan-lahan, lap tonsil pharyngeal dan dinding pharyngeal belakang 3 kali dengan cepat.
3.Letakkan swab segera ke dalam tiub pensampelan.Kepala swab hendaklah diputar dan dicampurkan dalam larutan simpanan selama sekurang-kurangnya 30 saat untuk memastikan sampel dicairkan sepenuhnya dalam tiub pensampelan.
4. Pengeraman pada suhu bilik (20~ 25℃) selama 1min, penyediaan penimbal lisis selesai.
5. Kedua-dua sistem 25μl RT-PCR dan RT-LAMP serasi dengan amaun 10μl penambahan templat untuk eksperimen pengesanan.
Nota
1. Jumlah minimum sampel lisat langsung yang sepadan dengan swab tunggal boleh dilaraskan kepada 400μl, yang boleh diselaraskan mengikut keperluan ujian.
2. Setelah sampel diproses oleh reagen pelepas sampel, adalah disyorkan untuk menjalankan fasa ujian seterusnya secepat mungkin, selang masa menunggu sebaik-baiknya kurang daripada 1 jam.
3. pH sampel lisat adalah berasid, dan sistem pengesanan perlu mempunyai penimbal tertentu.Ia sesuai untuk kebanyakan pengesanan pendarfluor PCR, RT-PCR dan LAMP dengan penimbal pH, tetapi tidak sesuai untuk pengesanan kolorimetrik LAMP tanpa penimbal.
