RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Produk ini mengandungi penimbal tindak balas, Campuran RT-Enzim (Bst DNA polimerase dan transkripase songsang tahan haba), Pelindung terliofil dan komponen pewarna kromogenik.Untuk menggunakan, hanya gunakan Penampan, enzim tindak balas dan primer dicampur dan ditambah pada templat;menambah pelindung lyophilized boleh lurus.Ia disambungkan kepada lyophilizer dan lyophilized, dan hanya primer dan templat ditambah apabila digunakan.Kit ini menyediakan pengesanan visual yang cepat dan jelas bagi penguatan, tindak balas negatif ditunjukkan dalam warna merah dan tindak balas positif ditunjukkan oleh perubahan kepada kuning.
Komponen
| Komponen | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Penampan Amplifikasi pengantara gelung (dengan pewarna) | 0.96 mL | 4.80 mL×2 | 9.60 mL×10 |
| Campuran Enzim RT | 270 μL | 2.70 mL | 2.70 mL×10 |
| Pelindung lyophilized | 0.96 mL×2 | 9.60 mL×2 | 9.60 mL×20 |
Aplikasi
Untuk penguatan isoterma DNA atau RNA.
Keadaan Penyimpanan
Diangkut dengan ais kering, disimpan pada -25~ -15℃.Elakkan kerap beku-cair, produk ini sah selama 12 bulan.
Protokol
1.Cairkan penimbal tindak balas yang akan digunakan pada suhu bilik.Vortex secara ringkas atau terbalikkan tiub beberapa kali untuk bercampur dengan teliti, kemudian sentrifuge untuk mengumpul cecair ke bahagian bawah tiub.
2.Penyediaan sistem tindak balas.Reagen ini boleh disediakan dalam dua sistem tindak balas, campuran tindak balas cecair dan campuran sistem terliofil.
1) Sediakan campuran tindak balas cecair
| Komponen | Kelantangan |
| Penampan Amplifikasi pengantara gelung (dengan pewarna) | 10 μL |
| Campuran Enzim RT | 2.8 μL |
| 10 × Campuran Primera | 5 μL |
| Templat DNA/ RNA b | × μL |
| Air Tanpa Nukleus | Sehingga 50 μL |
2) Campuran sistem Lyophilization
① Sediakan campuran lyophilized
| Komponen | Kelantangan |
| Penampan Amplifikasi pengantara gelung (dengan pewarna) | 10 μL |
| Pelindung lyophilized | 20 μL |
| Campuran Enzim RT | 2.8 μL |
| Air Tanpa Nukleus | Sehingga 50 μL |
② Liofilisasi: Campuran yang disediakan telah diliofilkan dalam sistem 50μL
③ Sediakan campuran tindak balas
| Komponen | Kelantangan |
| Campuran lyophilized | 1 keping |
| 10 × Campuran Primera | 5 μL |
| Templat DNA/ RNA b | × μL |
| Air Tanpa Nukleus | Sehingga 50 μL |
Nota:
1) a.10×Primer Campuran : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Gelung F/B;
2) b.DEPC (larut air) disyorkan untuk templ asid nukleik.
1.Inkubasi pada 65°C selama 30-45minit, yang boleh dilanjutkan dengan sewajarnya mengikut perubahan warna Masa tindak balas.
2.Mengikut mata kasar, kuning positif dan merah negatif.
Nota
1.Garam mungkin muncul di bahagian bawah tiub penimbal, pusaran sebentar atau tiub terbalikkan beberapa kali untuk dicampur dengan teliti pada suhu bilik.
2.Suhu tindak balas boleh dioptimumkan antara 62 ℃ dan 68 ℃ mengikut keadaan primer.
3.Reagen yang dibungkus tidak boleh terdedah kepada udara untuk masa yang lama.
4.Reaksi perubahan warna merah dan kuning bergantung pada perubahan pH sistem tindak balas, sila jangan gunakan larutan penyimpanan asid nukleik Tris yang mengandungi, disyorkan untuk menggunakan ddH2O disimpan asid nukleik;
5.Eksperimen harus diseragamkan, termasuk penyediaan sistem tindak balas, lyophilization, dan pemprosesan sampel dan proses penambahan sampel;
6.Untuk mengelakkan pencemaran, adalah disyorkan untuk menyediakan sistem tindak balas dalam bangku ultra-bersih, dalam templat Tambah lain pada hud wasap bilik untuk mengelakkan gangguan positif palsu.
