Fosfatase Alkali (ALP)
Penerangan
Fosfatase Beralkali diperoleh daripada strain E. coli rekombinan yang membawa gen TAB5.Enzim ini memangkinkan penyahfosforilasi 5' dan 3' hujung fosfomonoester DNA dan RNA.Juga, ia menghidrolisis ribosa, serta deoksiribonukleosida trifosfat (NTP dan dNTP).TAB5 Alkali Fosfatase bertindak pada 5´ yang terkeluar, 5´ yang ceruk dan tumpul.Fosfatase boleh digunakan dalam banyak aplikasi biologi molekul, seperti pengklonan atau pelabelan hujung probe untuk membuang hujung DNA atau RNA yang terfosforilasi.Dalam eksperimen pengklonan, nyahfosforilasi menghalang DNA plasmid linear daripada pengikatan diri.Ia juga boleh merendahkan dNTP yang tidak diperbadankan dalam tindak balas PCR untuk menyediakan templat untuk penjujukan DNA.Enzim dinyahaktifkan sepenuhnya dan tidak dapat dipulihkan dengan memanaskan pada 70°C selama 5 minit, dengan itu menjadikan penyingkiran fosfatase sebelum pengikatan atau pelabelan akhir tidak diperlukan.
Penggunaan
1. Fosfatase beralkali digabungkan dengan protein (antibodi, streptavidin dll,) boleh mengenal pasti molekul sasaran secara khusus, dan boleh digunakan dalam pengesanan ELISA, WB dan histokimia;
2.Alkali fosfatase boleh digunakan untuk menyahfosfori 5'-terminal DNA atau RNA untuk mengelakkan penyambungan diri;
3. DNA atau RNA defosforilasi di atas boleh dilabelkan oleh fosfat berlabel radio (melalui T4 poli-nukleotida kinase)
Struktur Kimia
Spesifikasi
| Item Ujian | Spesifikasi |
| Aktiviti Enzim | 5U/μL |
| Aktiviti Endonuklease | Tidak dapat dikesan |
| Aktiviti Exonuuclease | Tidak dapat dikesan |
| Aktiviti Nicking | Tidak dapat dikesan |
| Aktiviti RNase | Tidak dapat dikesan |
| DNA E.coli | ≤1 salinan/5U |
| Endotoksin | Ujian LAL, ≤10EU/mg |
| Kesucian | ≥95% |
Pengangkutan dan penyimpanan
Pengangkutan:Ambien
Penyimpanan :Simpan pada suhu 2-8°C
Ujian semula yang disyorkankehidupan:2 tahun
