Nuklease Ultra
UltraNuclease ialah endonuclaese kejuruteraan genetik yang diperolehi daripada Serratia marcescens, yang mampu merendahkan DNA atau RNA, sama ada untai dua atau tunggal, linear atau bulat di bawah pelbagai keadaan, merendahkan sepenuhnya asid nukleik kepada oligonukleotida 5'-monophosphate dengan panjang 3-5 asas. .Selepas pengubahsuaian kejuruteraan genetik, produk telah ditapai, diekspresikan, dan ditulenkan dalam Escherichia coli (E. coli), yang mengurangkan kelikatan supernatan sel dan penyelidikan inscientific lysate sel, tetapi juga meningkatkan kecekapan penulenan dan penyelidikan fungsi protein.Ia juga boleh digunakan dalam terapi gen, penulenan virus, pengeluaran vaksin, industri farmaseutikal protein dan polisakarida sebagai reagen penyingkiran asid nukleik hos.
Ciri-ciri Produk
CAS No. | 9025-65-4 |
SPR No. | |
Berat Molekul | 30kDa |
Titik Isoelektrik | 6.85 |
Kesucian Protein | ≥99%( SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
Aktiviti Khusus | ≥1.1×106U/mg |
Suhu Optimum | 37°C |
pH optimum | 8.0 |
ProteaseAktiviti | negatif |
Beban bio | <10CFU/100,000U |
Sisa Protein Sel Hos | ≤10ppm |
Logam berat | ≤10ppm |
Endotoksin Bakteria | <0.25EU/1000U |
Penampan Storan | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl ,50% Gliserol |
Keadaan penyimpanan
Pengangkutan ≤0°C;-25~-15°C Penyimpanan,kesahan 2 tahun (elakkan pencairan beku).
Definisi Unit
Jumlah enzim yang digunakan untuk menukar nilai penyerapan △A260 sebanyak 1.0 dalam masa 30 minit pada 37 °C, pH 8.0, bersamaan dengan 37μg DNA sperma salmon yang dicerna dengan memotong kepada oligonukleotida, ditakrifkan sebagai unit aktif(U).
Kawalan kualiti
Sisa Protein Sel Hos: Kit ELISA
•Protease Sisa: 250KU/mL UltraNuclease bertindak balas dengan substrat selama 60 minit, tiada aktiviti dikesan.
•Endotoksin Bakteria: Ujian LAL, Farmakope Republik Rakyat China Jilid 4 (Edisi 2020) kaedah ujian had gel.Peraturan Am (1143).
•Beban bio: Farmakope Republik Rakyat China Jilid 4 (Edisi 2020)— Umum
Peraturan untuk Ujian Kemandulan (1101), Standard Kebangsaan PRC, GB 4789.2-2016.
•Logam berat:ICP-AES, HJ776-2015.
Operasi
Aktiviti UltraNuclease telah dihalang dengan ketara apabila kepekatan SDS melebihi 0.1% atau EDTA
kepekatan melebihi 1mM. Surfaktan Triton X- 100, Tween 20 dan Tween 80 tidak mempunyai kesan ke atas nuklease
sifat apabila kepekatan di bawah 1.5%.
Operasi | Operasi Optimum | Operasi yang sah |
Suhu | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Mg2+ | 1-2mM | 1- 15mM |
DTT | 0- 100mM | >100mM |
2-Mercaptoethanol | 0- 100mM | >100mM |
Ion logam monovalen (Na+, K+ dsb.) | 0-20mM | 0-200mM |
PO43- | 0- 10mM | 0- 100mM |
Penggunaan dan Dos
• Keluarkan asid nukleik eksogen daripada produk vaksin, kurangkan risiko ketoksikan asid nukleik sisa dan tingkatkan keselamatan produk.
• Mengurangkan kelikatan cecair suapan yang disebabkan oleh asid nukleik, memendekkan masa pemprosesan dan meningkatkan hasil protein.
• Keluarkan asid nukleik yang membalut zarah (virus, badan inklusi, dll.), yang kondusif
kepada pembebasan dan penulenan zarah.
Jenis Eksperimen | Pengeluaran Protein | Virus, Vaksin | Dadah Sel |
Nombor Sel | Berat basah sel 1g (digantung semula dengan penimbal 10ml) | 1L penapaian supernatan cecair | budaya 1L |
Dos Minimum | 250U | 100U | 100U |
Dos yang Disyorkan | 2500U | 25000U | 5000U |
• Rawatan nuklease boleh meningkatkan resolusi dan pemulihan sampel untuk kromatografi lajur, elektroforesis dan analisis blotting.
• Dalam terapi gen, asid nukleik dikeluarkan untuk mendapatkan virus berkaitan adeno yang telah dimurnikan.