Satu Langkah Cepat RT-qPCR Probe Premix-UNG
No Cat: HCR5143A
Kit Siasatan RT-qPCR Satu Langkah (UNTUK CEPAT) ialah kit pengesanan pantas RT-qPCR berasaskan siasatan yang sesuai untuk PCR kuantitatif satu-plex atau multipleks menggunakan RNA sebagai templat (seperti virus RNA).Produk ini menggunakan generasi baharu Taq DNA Polymerase yang diubah suai antibodi dan Transkripase Terbalik khusus satu langkah, dengan penimbal yang dioptimumkan untuk penguatan pantas, yang mempunyai kelajuan penguatan yang lebih pantas, kecekapan dan kekhususan penguatan yang lebih tinggi.Ia menyokong penguatan seimbang dalam kedua-dua plex tunggal dan pemultipleks sampel kepekatan rendah dan tinggi dalam masa yang singkat.
Komponen
1. 5×RT-qPCR penimbal (U+)
2. Campuran enzim (U+)
Nota:
a.5×RT-qPCR penimbal (U+)termasuk dNTP dan Mg2+;
b.Campuran enzim (U+) termasuk transkripase terbalik, Hot Start Taq DNA polimerase, perencat RNase dan UDG;
c.Gunakan petua Bebas RNase, tiub EP, dsb.
Sebelum digunakan, campurkan penimbal 5×RT-qPCR (U+) dengan teliti.Jika terdapat sebarang pemendakan selepas pencairan, tunggu penimbal kembali ke suhu bilik, gaul dan larut, kemudian gunakannya seperti biasa.
Keadaan Penyimpanan
Produk dihantar dengan ais kering dan boleh disimpan pada -25~-15℃ selama 1 tahun.
Arahan
1. Tindak balas Sistem
| Komponen | Isipadu (20 μL tindak balas) |
| 2 ×RT-qPCR penimbal | 4μL |
| Campuran enzim (U+) | 0.8μL |
| Primer Hadapan | 0.1~ 1.0μM |
| Primer Songsang | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05~0.25μM |
| templat | X μL |
| Air Tanpa RNase | sehingga 25μL |
Nota: Isipadu tindak balas ialah 10-50μL.
2. Protokol Berbasikal (Standard)
| Kitaran langkah | Temp. | Masa | Kitaran |
| Transkripsi Songsang | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Denaturasi Awal | 95 ℃ | 30 saat | 1 |
| Denaturasi | 95 ℃ | 10 saat | 45 |
| Penyepuhlindapan/Pelanjutan | 60 ℃ | 30 saat |
| Protokol Berbasikal (Cepat) Kitaran langkah |
Temp. |
Masa |
Kitaran |
| Transkripsi Songsang | 55 ℃ | 5 minit | 1 |
| Denaturasi Awal | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturasi | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Penyepuhlindapan/Pelanjutan | 60 ℃ | 10 s |
Nota:
a.Suhu transkripsi terbalik adalah antara 50 ℃ hingga 60 ℃, meningkatkan suhu membantu menguatkan struktur kompleks dan templat kandungan CG tinggi;
b.Suhu penyepuhlindapan optimum perlu dilaraskan berdasarkan nilai Tm primer, dan pilih masa terpendek untuk pengumpulan isyarat pendarfluor berdasarkan instrumen PCR Masa Nyata.
Nota
Sila pakai PPE yang diperlukan, kot makmal dan sarung tangan, untuk memastikan kesihatan dan keselamatan anda!
